內源性干擾是免疫檢測中使用的試劑抗體與病人樣本中的內源性物質發生交叉反應所致,添加阻斷劑能消除或者降低免疫分析中的內源性干擾,提高試劑盒檢測系統的靈敏度與精密度。
阻斷劑主要用于雙抗體夾心法、競爭抑制法、IgM檢測、免疫比濁、化學發光、膠體金側向層析等。(單克隆抗體)
1.類風濕因子(rheumatoid factor, RF)
l 以變性IgG為靶抗原的自身抗體
l IgM、IgA、IgG、IgD、IgE五型,68%-80%為IgM型
l 與天然IgG結合能力較差,易于人和動物的變性IgG或免疫復合物中的IgG結合
l 異嗜性抗體干擾的程度、頻率與其濃度、親和力以l 干擾產生具有隨機性,與RF濃度無關
2.異嗜性抗體(Heterophil antibody, HA)
l 人外周循環血中存在的抗不明確抗原的抗體,通常是多特異性、親和力較弱的抗體。
及檢測系統有關
3.人抗動物抗體(Human anti Animal Antibody, HAAA)
l 具有抗動物蛋白活性的抗體,由醫源性與非醫源性引起。最常見的是人抗小鼠抗體(HAMA)
l 不同物種的HAAA相互之間有交叉
l 針對抗原明確,較強親和力
免疫阻斷劑主要分為以下幾類:
被動阻斷劑,一般為正常動物血清或正常動物IgG,其工作原理為通過高濃度添加,使干擾抗體優先與阻斷劑結合而不與檢測抗體或捕獲抗體結合,從而降低干擾。通常,被動阻斷劑只會封閉一種干擾抗體的活性,并且其效果取決于干擾抗體的親和力。
主動阻斷劑,一類對干擾抗體具有高親和力的試劑。與干擾抗體結合后,可以通過位阻效應阻斷干擾抗體與檢測抗體或捕獲抗體的結合。主動阻斷劑優于被動阻斷劑在于其只需要低濃度,即可實現高效阻斷,避免阻斷劑對正常檢測過程的影響。
IgM檢測專用阻斷劑,檢測之前用于去除人血清樣本中RF因子和IgG,顯著提高IgM檢測的靈敏度和特異性。