二十世紀60年代初期MacFarlane、Davie和Ratnoff等分別提出了凝血過程的“瀑布學說”認為血液中的凝血因子以無活性酶原形式存在，當某一凝血因子被激活后，可使許多凝血因子按一定的次序先后被激活，彼此之間有復雜的催化作用，又被稱為“瀑布樣學說”。認為凝血是一系列凝血因子相繼被酶解激活的過程，凝血因子按一定順序被激活，最終使纖維蛋白原轉變為纖維蛋白的過程，分為內源性途徑、外源性途徑和共同凝血途徑。

“凝血瀑布”圖

凝血過程可分為三個階段，一是凝血酶原激活物形成，二是凝血酶形成，三是纖維蛋白形成。刺破小血管造成機體出血時先是受損血管收縮，使傷口縮小、血流減慢、凝血物質聚集，局部血液粘稠度會增高，有利于止血。血管內皮下成分暴露致使血小板活化，發生黏附、聚集、釋放反應，局部形成血小板血栓堵塞傷口。同時，暴露的內皮下組分激活Ⅻ因子啟動內源性凝血途徑，釋放組織因子啟動外源性凝血途徑，最終形成纖維蛋白血栓，堵塞傷口，完成凝血。其中參與內源性凝血因子有Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ因子，參與外源性凝血的因子有Ⅲ、Ⅶ因子，參與共同途徑的凝血因子有Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅹ因子，由這些因子共同完成血液的凝固過程。

血凝檢測的主要方法有三種：凝固法、發色底物法和免疫比濁法。

目前，凝固法是最常使用的血凝檢測方法，它是根據血漿凝固過程中特定屬性的變化來測定凝血功能。根據觀測屬性的不同，凝固法又可分為光學法和磁珠法，如果應用光學原理檢測濁度的變化則屬于光學法，應用磁珠運動檢測黏度的變化則屬于磁珠法(一種機械法測量)。其中，光學法血凝檢測更為常見，其儀器制造成本也更低。而磁珠法血凝檢測主要面向高端市場，其檢測樣本量可以比光學法血凝檢測的試劑用量更低，并且不受樣品的光學異常、加樣中的氣泡等影響，大大節約試劑用量并提高檢測結果的準確度

免疫比濁法是將被檢物與其相應抗體混合形成復合物，從而產生足夠大的沉淀顆粒，通過透射比濁或散射比濁進行測定。此法操作簡便，準確性好，便于自動化。

其中發色底物法是通過測定產色底物的吸光度變化來推測所測物質的含量和活性的，該方法又可稱為生物化學法。其原理是通過人工合成與天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列順序、并含有特定作用位點的發色小肽，并將可水解產色的化學基因與作用位點的氨基酸相連。測定時由于凝血因子具有蛋白水解酶的活性，它不僅能作用于天然蛋白質肽鏈，也能作用于人工合成的肽鏈底物，從而釋放出產色基因，使溶液呈色。產生顏色的深淺與凝血因子活性成比例關系，故可進行精確的定量。

它以酶學方法為基礎，便于自動化和標準化，主要檢測蛋白酶類的指標，如抗凝血酶，組織型纖溶酶原激活物，纖溶酶原激活劑抑制物（PAI)及肝素等。

發色底物為化學合成的小肽，其一端為發色基團（pNA）。特定的酶（如凝血酶）可將pNA催化解離下來，游離pNA可通過分光光度計或酶標儀檢測，從而確定相應物質的活性。

常見的發色底物有：凝血酶發色底物S-2238，FXa發色底物S-2765等。

發色底物法是目前主要的肝素效價檢測方法，是歐洲藥典和美國藥典中規定的肝素（特別是低分子肝素）檢測方法。該方法也廣泛用于實驗室研究和體外診斷。優點主要表現在：用酶學方法直接定量、測定結果準確、重復性好、便于自動化和標準化、所需樣品量小。

凝血儀使用產色物質在檢測血栓／止血指標時大致可分成三種模式。
①對酶的檢測：即在含酶的樣品中直接加入產色物質，因為酶可裂解產色物質釋放PNA，監測由于PNA釋放而導致被檢樣品在405nm處光吸收的變化，就可推算樣品中酶的活性。如對凝血酶、纖溶酶等的檢測。
②對酶原的檢測：?要對某種酶原進行測定，必須先用激活劑將其激活，使其活化位點暴露，才可將產色物質上的PNA裂解下來。加入的激活劑必須過量，因為只有這樣才能使酶原被全部激活，酶原的量才會同樣品中酶的活性成一定的數量關系。樣品中酶的活性可通過PNA釋放，即樣品吸光度的變化反應出來，由此則可推算出樣品中酶原的含量。
③對酶抑制物的檢測：?首先往待檢樣品中加入過量對應的酶中和該抑制物，剩余的酶可裂解產色物質釋放PNA，監測由于PNA釋放而導致光吸收的變化，就可測出酶的活性，進而可推算出樣品中抑制物的含量。如對抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）等。

雅為凝血原料